Enfeksiyon Paneli
Kızamık Virüs Rt-PCR Kiti
Katalog No: DiaRD-MeV
Kızamık, Paramyxoviridae ailesinin Morbillivirus cinsinde yer alan tek sarmallı RNA içeren, zarflı Measles (kızamık) virüsünün oluşturduğu akut viral bir solunum yolu hastalığıdır. Ateş ve kırgınlık, öksürük, nezle ve konjunktivit -üç "C"- prodromu, patognomonik Koplik lekeleri ve ardından makülopapüler döküntü ile karakterizedir. Hastalar, döküntünün ortaya çıkmasından 4 gün öncesinden 4 gün sonrasına kadar bulaşıcı olarak kabul edilir. Etkili bir aşısı olmasına rağmen yılda yaklaşık 100.000 kişinin ölümüne sebep olmaktadır. Sporadik ve salgın vakalarının laboratuvar doğrulaması gerekmektedir. Kızamık vakalarının doğrulanmasında serumda virüs spesifik IgM antikorları ve solunum yolu örneklerinde reverse transkripsiyon real-time polymerase chain reaksiyon (RT-PCR) yöntemiyle viral RNA gösterilmesi yaygın olarak kullanılan yöntemlerdir. Kizamık olabileceği düşünülen vakalardan serum ve solunum yolu örneklerinin her ikisi de alınmalıdır. İdrar virus içerebilir, mümkün ise solunum yolu örnekleri yanında idrar örneğinin de alınması kızamık virusunu saptama olasılığını artırmaktadır . Örneklerin döküntülerin başladığı ilk 3 gün içerisinde alınması viral RNA saptanma olasılığını artırmakla birlikte 7-10 gün içerisinde alınan örneklerden de viral RNA saptanabilir .
DiaRD-MeV RT-PCR kiti idrar, nazofarengeal ve boğaz sürüntü örneklerden kızamık virüs RNA’sını saptamak amacıyla geliştirilmiş bir ”one-step RT-PCT” tanı kitidir. Kit içerisinde Kızamık virüsünün N3 geni içerisindeki 75 baz uzunluğundaki bölgenin amplifikasyonunu sağlayan primerler ve çoğalmayı saptayacak florofor boya ve baskılayıcı ile işaretli TaqMan prob bulunmaktadır. Örnekte Kızamık virüs RNA bulunması halinde uygulanmakta olan amplifikasyon programı süresince ileri (forward) ve geri (reverse) primerler ile hedef bölge çoğaltılmaktadır. Amplifikasyon programının bağlanma (anneling) aşamasında TaqMan problar hedef bölgeye tutunmakta, uzama (ekstensiyon) aşamasında DNA polimeraz enziminin probu 5’ uçlarından kesmesiyle bu uca bağlanmış olan floresan boya probun 3’ucundaki baskılayıcıdan kurtularak floresan vermektedir. Oluşan floresan sinyalleri amplifikasyon süresince toplanmakta ve amplifikasyon grafikleri halinde rapor edilmektedir.
|