Katalog No: DiaRD-EBV

DiaRD-EBV Rt-PCR kiti, Epstein-Barr enfeksiyonu olan hastalarının plazmasında EBV DNA kantitasyonunu yapabilmek için gerekli tüm bileşenleri bulunduran kantitatif bir gerçek zamanlı bir polimeraz zincir reaksiyonudur. Kit içerisinde EBV- BALF5 geni içerisindeki 90 baz çiftlik bölgenin amplifikasyonunu sağlayan primerler ve çoğalmayı saptayacak florofor boya ve baskılayıcı ile işaretli TaqMan prob bulunmaktadır. Örnekte EBV DNA bulunması halinde uygulanmakta olan amplifikasyon programı süresince ileri (forward) ve geri (reverse) primerler ile hedef bölge çoğaltılmaktadır. Amplifikasyon programının bağlanma (anneling) aşamasında TaqMan problar hedef bölgeye tutunmakta, uzama (ekstensiyon) aşamasında DNA polimeraz enziminin probu 5’ uçlarından kesmesiyle bu uca bağlanmış olan floresan boya probun 3’ucundaki baskılayıcıdan kurtularak floresan vermektedir. Oluşan floresan sinyalleri amplifikasyon süresince toplanmakta ve amplifikasyon grafikleri halinde rapor edilmektedir. 

Kit kapsamında, olası PCR inhibitörlerin tespitini sağlamak için hedef gen ile aynı uzunluk ve benzer baz içeriğine sahip, primer bağlanma bölgesi hedef gen ile özdeş, ancak prob bağlanma bölgesi özgü olan plazmit kaynaklı internal kontrol (İK) DNA’sı (5.0x10E+5 IU/mL) yer almaktadır. 

EBV DNA yükünün belirlenmesi için dört adet kantitasyon standardı (5.0x104 IU/mL- 5.0x107 IU/mL) bulunmaktadır.

Pozitif kontrol olarak EBV DNA yükü 5.0x104 IU/mL olan sentetik plazmit, negatif kontrol olarak steril PCR kalitesinde su bulunmaktadır.