Enfeksiyon Paneli
HIV Quantitive Rt-PCR kit
Katalog No: DiaRD-qHIV
HIV-1 Rt-PCR kantitatif kiti AIDS (acquired immunedefficiency syndrome) hastalarının plazmasında HIV-1 RNA yükünün in vitro ortamda kantitatif olarak belirlenmesi amacıyla geliştirilmiş bir gerçek zamanlı reverse transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyon temelli (Real-time reverse transkripsiyon polymerase chain reaction:RT-qPCR) moleküler tanı kitidir. Kit klinik bulgular ve diğer laboratuvar verileriyle birlikte hastalığın prognozu ve anti-viral tedavinin etkinliğini takip etmede yardımcı olacak bir kantitatif testtir.
Kit içerisinde HIV-1 genomunun long terminal repeat (LTR) içerisindeki 121 bazlık bölgenin amplifikasyonunu sağlayan primerler ve çoğalmayı saptayacak florofor boya ve baskılayıcı ile işaretli TaqMan prob ve dört adet kantitasyon standardı (KS1-KS4) bulunmaktadır. Örnekte HIV-1 RNA bulunması halinde reverse transkripsiyon aşamasından sonra uygulanmakta olan amplifikasyon programı süresince ileri (forward) ve geri (reverse) primerler ile hedef bölge çoğaltılmaktadır. Amplifikasyon programının bağlanma (anneling) aşamasında TaqMan problar hedef bölgeye tutunmakta, uzama (ekstensiyon) aşamasında DNA polimeraz enziminin probu 5’ uçlarından kesmesiyle bu uca bağlanmış olan floresan boya probun 3’ucundaki baskılayıcıdan kurtularak floresan vermektedir. Oluşan floresan sinyalleri amplifikasyon süresince toplanmakta ve amplifikasyon grafikleri halinde rapor edilmektedir. Her çalışmada kullanılan kantitasyon standartları (KS1-KS4)’na ait kopya/mL verileri ve bunlara karşılık gelen Ct değerleri kullanılarak oluşturulan standard eğriden pozitif örneklerdeki HIV-1 RNA yükü belirlenmektedir.