Katalog No: DiaRD-CMV

DiaRD-CMV Rt-PCR kiti, Cytomegalovirus enfeksiyonu olan hastaların plazma, amniyotik sıvı, beyin omurilik sıvısı ve idrar örneklerinde CMV DNA kantitasyonunu yapabilmek için gerekli tüm bileşenleri bulunduran kantitatif bir gerçek zamanlı bir polimeraz zincir reaksiyonudur. Kit içerisinde CMV-UL83 geni (unique long 83 gene [65 kDa fosfoproteini =pp65 kodlar] içerisindeki 79 baz çiftlik bölgenin amplifikasyonunu sağlayan primerler ve çoğalmayı saptayacak florofor boya ve baskılayıcı ile işaretli TaqMan prob bulunmaktadır. Örnekte CMV DNA bulunması halinde uygulanmakta olan amplifikasyon programı süresince ileri (forward) ve geri (reverse) primerler ile hedef bölge çoğaltılmaktadır. Amplifikasyon programının bağlanma (anneling) aşamasında TaqMan problar hedef bölgeye tutunmakta, uzama (ekstensiyon) aşamasında DNA polimeraz enziminin probu 5’ uçlarından kesmesiyle bu uca bağlanmış olan floresan boya probun 3’ucundaki baskılayıcıdan kurtularak floresan vermektedir. Oluşan floresan sinyalleri amplifikasyon süresince toplanmakta ve amplifikasyon grafikleri halinde rapor edilmektedir. 

Kit kapsamında, olası PCR inhibitörlerin tespitini sağlamak için hedef gen ile aynı uzunluk ve benzer baz içeriğine sahip, primer bağlanma bölgesi hedef gen ile özdeş, ancak prob bağlanma bölgesi özgü olan plazmit kaynaklı internal kontrol (İK) DNA’sı (1.00x104 IU/mL) yer almaktadır. 

CMV DNA yükünün belirlenmesi için dört adet kantitasyon standardı (1.0x104 IU/mL- 1.0x107 IU/mL) bulunmaktadır.

Pozitif kontrol olarak CMV DNA yükü 1.0x104 IU/mL olarak belirlenen sentetik plazmit DNA’sı, negatif kontrol olarak steril PCR kalitesinde su bulunmaktadır.